撰文丨燕小六
当地时间1月18日，美国宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院宣布，成功完成世界首例基因编辑猪肝用于人的体外肝脏灌注。
被放在器官保存设备中的供体猪肝，和一名脑死亡者的腹股沟、颈部等动静脉相连。其自身肝脏没有切除，血液经体外猪肝净化后，回输到体内。
研究团队表示，72小时的研究期内，基因编辑猪肝成功过滤血液，这名脑死亡者生命体征稳定。这说明，基因编辑猪肝可以在一段时间内替代人肝、发挥功能。这或有助于阻断病情进展，让自体肝脏得以修复。另外，或能延长存活时间，为成功过渡到肝移植创造条件。
“这属于基因编辑猪肝人体移植前的尝试。”复旦大学上海医学院副院长、上海市器官移植重点实验室主任朱同玉告诉“医学界”，肝脏移植非常复杂。猪肝用于人体移植，还有一系列问题要解决。
图源：MIT Technology Review
达成目标
此例猪肝人体试验的主刀医生亚伯拉罕·沙克（Abraham Shaked）已经完成2500余例肝移植手术。他介绍，肝脏是人体最大的器官，主要肩负两项职责：第一，调节关键酶和物质，如葡萄糖、胆固醇等；第二，净化血液、滤出毒素。
根据美国肝脏基金会信息，美国每年发生33万余例肝衰竭，约有1.7万人在等待肝脏供体。《2019年中国器官捐献与移植等待现状分析》显示，2019年共有8.1万余人活跃在等待名单中，包括肝移植等待者14399例。同年，在这8万余名等待者中，仅有19454例（23.90%）接受器官移植。器官短缺依旧是制约器官移植事业发展的主要原因之一。
医疗界一直在寻求解决方案，希望或是增加肝源供给，或是促进肝细胞再生，或是暂时替代体内衰竭的肝脏，以延长患者生命。最后一种方法就是体外肝脏灌注技术。目前已经发展出一套较为成熟的体外机械设备、理化和生物装置，能净化血液、加工营养素、改善内环境等。
沙克介绍，此例试验的主要目的，是观察猪肝能否替代人肝、有效净化血液。在72小时的研究期内，这一目标达成。基因编辑猪肝的血流量稳定，被移植者的生理体征良好。
进一步分析显示，基因编辑猪肝能产生胆汁、没有炎症迹象。被移植者未出现排异反应，且胆红素等肝功能指标有所改善，这或说明猪肝正在促进患者自体干细胞生成。
沙克认为，基于体外肝脏灌注技术和理念，基因编辑猪肝或将是首个获批用于临床的异种器官。
摘下“圣杯”
“异种肝移植是器官移植中的‘圣杯’。1960年代至今，医学界一直在尝试。”《时代》等媒体指出。
1958年，Otto等首先在动物实验中，证实用异种肝脏灌注治疗能降低血氨，开创体外灌注技术治疗肝衰竭的先河。此后，多个动物实验相续开展。
有研究统计，20世纪六七十年代共有159例患者入组研究。用于体外灌注的肝脏包括同种的人，以及异种的牛、狗、狒狒和猪等。期间，相关技术的临床应用使得将近一半肝昏迷患者得以缓解，但总体生存率不足20%，远未达到学者们希望的“治愈”目标。1992年，Starzl将狒狒肝脏移植给1名急性暴发性肝衰竭者，患者存活70天，最后死于复合性感染。
一方面，异种肝移植或辅助移植的手术难度大。《临床肝胆病杂志》2022年刊发陶开山等观点文章，作者结合自己的手术经验发现，异种血管口径相差较大，吻合口易形成血栓。
另一方面，“肝脏移植跟心、肾移植有很多不同。肾脏的主要功能是过滤、泌尿，心脏类似一个机械泵。但肝脏具有很多生理功能，包括要产生大量的蛋白等。人体所需的蛋白酶大都是肝脏产生的。可以说，肝脏干的活很多，成功移植的难度就更大。”朱同玉告诉“医学界”。
《器官移植》2022年7月刊文指出，猪肝产生的100多种蛋白质可能不会在人体内充分发挥作用。此外，人肝细胞和猪肝细胞在凝血蛋白表达、功能调节方面，存在物种特异性差异。这种差异可能导致凝血异常，从而影响移植肝脏的血液供应等。
“要对供体猪进行更多的基因改造，使其能产生人类需要的功能蛋白。”《器官移植》一文如是说。
本次美国宾夕法尼亚大学研究考虑到这一点。其所用供体猪来自生物技术公司eGenesis。该司使用CRISPR技术，对猪进行共69次基因编辑：首先，敲除3种猪特有的聚糖抗原相关基因。其次，插入7个与炎症、凝血、细胞凋亡等免疫调节相关的人源基因。这两步都有助于减少排异反应。再次，剩余59处编辑旨在让猪逆转录病毒基因的所有拷贝失活，减少潜在感染风险。
2023年10月，《自然》发文称，经过前述基因编辑的猪肾移植给食蟹猴后，有5只存活超过1年，其中1只存活超过2年。监测、分析猴子体内的猪肾会发现，供体肾起到了与原生肾几乎相同的功能。
“多基因修饰的趋势是明确的。”新近发布的《走向临床的异种器官移植》一文指出，目前还不清楚多基因改造对人类是否全部有意义。2021年以来，全球完成2例活体异种器官移植、6例脑死亡异种器官移植，并启动了异种肾移植的Ⅰ期临床试验。相关研究中，只有2项采用了单基因修饰猪，其余皆为10基因修饰猪。
猪肝移植的未来
沙克表示，前述单一患者研究只是逐梦异种肝移植的开始。到今年年底前，他们将继续推进，初步计划是招募3位脑死亡患者，在移除其自体肝脏的情况下，进行基因编辑猪肝的体外灌注。
eGenesis公司本月将会晤美国FDA，计划通过“同情使用申请”，对1位肝衰竭患者使用相关技术。该司还准备在今年年内，启动相关技术的临床试验申请。
沙克坦言，还有一些问题没有解决。“通常，人源肝脏只能在体外保存约9个小时。前述研究使用了一种特殊的器官存储设备，能延长供体肝脏保存时间至24小时。我们不清楚猪肝能保存多长时间。”
美国得克萨斯大学西南医学中心外科教授、移植科主任帕西亚·瓦格菲（Parsia Vagefi）没有参与前述研究。他指出，基因编辑结合灌注装置是否有助于支持活体患者，有待观察。而纽约大学朗格健康中心移植研究所外科主任亚当·格里莫丝（Adam Griesemer）认为，体外灌注或是猪肝的“唯一应用前景”。
前述《走向临床的异种器官移植》指出，在已经完成的异种移植研究中，异种器官的功能性存活仍不能满足临床需求，跨物种感染仍是潜在威胁，但“经过近40年的基础和转化科学研究，异种移植已接近正式的临床试验。”
参考文献：
1.Penn Medicine Achieves First Successful External Liver Perfusion Using a Porcine Liver, Pointing to a Potential Bridge-to-Transplant Approach. Penn Medcine News
2.How Pigs Could Help People Who Need Liver Transplants. Time
3.A brain-dead man was attached to a gene-edited pig liver for three days. MIT
4.异种肝移植手术的特点与难点. Journal of Clinical Hepatology/Linchuang Gandanbing Zazhi. 2022, Vol 38, Issue 10, p2206. 10.3969/j.issn.1001-5256.2022.10.002
5.2019年中国器官捐献与移植等待现状分析. 中华器官移植杂志. 2021,42(6):324-325. DOI:10.3760/cma.j.cn421203-20210108-00014
6.走向临床的异种器官移植. 器官移植. DOI:10.3969/j.issn.1674-7445.2023234
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雷达卡
发表于
2024-1-20 09:10:43
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